細(xì)胞凋亡 是生物體發(fā)育過程中普遍存在的，是一個(gè)由基因決定的細(xì)胞主動(dòng)有序的死亡方式。具體指細(xì)胞遇到內(nèi)、外環(huán)境因子刺激時(shí)，受基因調(diào)控啟動(dòng)的自殺保護(hù)措施，包括一些分子機(jī)制的誘導(dǎo)激活和基因編程，通過這種方式去除體內(nèi)非必需細(xì)胞。而細(xì)胞發(fā)生程序性死亡時(shí)，凋亡的細(xì)胞散在于正常組織細(xì)胞中，無炎癥反應(yīng)，不遺留瘢痕。死亡的細(xì)胞碎片很快被巨噬細(xì)胞或鄰近細(xì)胞清除，不影響其他細(xì)胞的正常功能。 百恩維為您提供以下凋亡檢測(cè)服務(wù) 1）流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡——Annexin V/PI 雙染色法 在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面，這些細(xì)胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸（PS）從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外，使PS暴露在細(xì)胞膜外表面。Annexin V是一種Ca+依賴的磷脂結(jié)合蛋白，最初發(fā)現(xiàn)是一種具有很強(qiáng)的抗凝血特性的血管蛋白，Annexin V具有易于結(jié)合到磷脂類如PS的特性，對(duì)PS有高度的親和性。因此，該蛋白可充當(dāng)敏感的探針檢測(cè)暴露在細(xì)胞膜表面的PS。但PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所獨(dú)特的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的，而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就破壞了， 殘廢的細(xì)胞其細(xì)胞膜通透，可被碘化丙啶，一種核酸染料染成紅色。如將Annexin V標(biāo)以熒光素（RPE、FITC等）作為熒光探針，結(jié)合PI，利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞檢，就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開來。 2）TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡 TUNEL原理： 細(xì)胞凋亡中，染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3’-OH末端，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標(biāo)記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的Streptavidin (Streptavidin-HRP)結(jié)合，最后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細(xì)胞。而正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎DNA的斷裂，因而沒有3’-OH形成，很少能夠被染色。TUNEL法是一種高靈敏度又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。對(duì)于待檢測(cè)的細(xì)胞或組織樣品，經(jīng)過生物素標(biāo)記和后續(xù)的顯色等步驟，即可在普通光學(xué)顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞。 服務(wù)流程： 確定實(shí)驗(yàn)方案 客戶提供固定好的組織、細(xì)胞爬片、蠟塊或切片 檢測(cè)凋亡細(xì)胞 提供實(shí)驗(yàn)結(jié)果，包括成像圖片，實(shí)驗(yàn)報(bào)告及原始數(shù)據(jù)

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