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重組蛋白質(zhì)表達及相關(guān)技術(shù)服務(wù)
應(yīng)用蛋白表達與純化的專有技術(shù), 擁有高效率、高通量的一系列原核、真核蛋白表達純化系統(tǒng).
服務(wù)類別:分子與細胞總訪問:2602
最后更新:2010-1-29半年訪問:1
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應(yīng)用蛋白表達與純化的專有技術(shù), 擁有高效率、高通量的一系列原核、真核蛋白表達純化系統(tǒng),包括原核表達系統(tǒng)、昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)、CHO細胞表達系統(tǒng)以及近200平方米的重組蛋白表達實驗室和獨立的細胞培養(yǎng)實驗室。與制藥企業(yè)合作建立GMP發(fā)酵實驗室 , 擁有5~50升的生物反應(yīng)器, 可提供大規(guī)模蛋白表達服務(wù)。同時,提供以AKTA液相色譜分離系統(tǒng)為核心進行高質(zhì)量的多樣品、多步驟的蛋白純化服務(wù)。
1. 原核表達系統(tǒng)
采用優(yōu)化的條件誘導(dǎo)體系(Conditional Induction System)和自誘導(dǎo)體系(Auto-Induction System)進行蛋白表達,可以表達幾乎所有無特殊修飾的蛋白質(zhì);直接進行過夜培養(yǎng),增高細菌密度,并且提高外源蛋白的可溶性。
擁有多種具有獨立知識產(chǎn)權(quán)的標簽表達體系,可以提高重組蛋白的表達效率,增加所表達蛋白的純度。目前,我們已建立的大規(guī)模、高通量大腸桿菌表達系統(tǒng),表達量可以達到10~100mg/L。
2. 昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)
該系統(tǒng)的特點是:通過改進昆蟲桿狀病毒表達體系,實現(xiàn)高通量優(yōu)化表達條件,提高重組率,簡化病毒的篩選和檢測方法,縮短工作周期。目前,該體系的重組成功率達100% ,病毒滴度均大于1X108 pfu/ml,表達成功率達86%,表達量為1~6mg/L。
3. 畢赤酵母表達系統(tǒng)
為建立高效酵母表達系統(tǒng),我們在基因拷貝數(shù)、蛋白分泌信號以及標簽蛋白選擇等方面進行優(yōu)化,提高表達通量。此系統(tǒng)采用兩種表達方式:胞內(nèi)表達和胞外表達,后者采用蛋白質(zhì)正常分泌途徑,利于膜蛋白正確折疊,并且簡化了蛋白純化過程。目前已成功表達150多種蛋白,成功率達到75%,表達量為4~50mg/L。
4. CHO細胞表達系統(tǒng)
具有基于CHO細胞的真核表達系統(tǒng),獨到的技術(shù)可以在短時間內(nèi)協(xié)助國內(nèi)科研單位、制藥企業(yè)建立基于哺乳動物細胞的蛋白表達體系,該體系可以不依賴整合位點而達到高效表達的目的。同時,我們還提供基于該系統(tǒng)的重組蛋白表達服務(wù)。
5. 相關(guān)服務(wù)(表達載體構(gòu)建)
根據(jù)客戶需求,以優(yōu)異的質(zhì)量和快捷的交貨提供全基因合成服務(wù),包括PCR,連接,克隆和全長序列測定等項目。合成的基因可以根據(jù)客戶的需求連接到不同的載體(由客戶提供)上,最終提供凍存的菌種、凍干的質(zhì)粒和相關(guān)材料。
我們所制備的重組蛋白可用于藥物篩選、結(jié)構(gòu)生物學研究、細胞生物學研究、 蛋白質(zhì)組學研究等的一系列生物醫(yī)學領(lǐng)域的研究。
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