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賽默飛氨基糖苷類抗生素方法包發布,攻克檢測難題!

瀏覽次數:6432 發布日期:2019-4-28  來源:本站 本站原創,轉載請注明出處
氨基糖苷類抗生素(AGs)方法包發布,攻克行業檢測難題!
 
你知道嗎?
 
我國每年約有30000兒童因藥物性致聾陷入無聲世界,其中因抗生素使用不當致聾占了約一半。近年研究還發現,我國藥源性耳聾患者中50%與遺傳因素有關,而且屬“母系遺傳”,有家族史的患者應禁用氨基糖苷類藥物。
 
氨基糖苷類抗生素藥
 
因價格低廉、抗菌譜廣等特點,也應用于獸用藥殺菌以促進家畜生長。此類抗生素由2個或多個氨基糖基團通過糖苷和氨基環多醇鍵合而成,極性大,易溶于水,脂溶性差,人體和禽畜的胃腸道不易吸收,通過肌肉注射后大部分以原藥經腎排泄,通過糞肥可能遷移至土壤及周圍水體中,最終進入食物鏈,對動物和人體健康及生態系統構成潛在威脅。
 
 
氨基糖苷類抗生素藥分析檢測中的挑戰
 
由于此類化合物極性極大,常規色譜保留弱或無保留,無紫外吸收或紫外吸收弱,業內目前也沒有特別成熟穩定且靈敏的檢測方法。
 

Idea 1
 
對于極性化合物的檢測,一般會首先想到選用親水作用液相色譜-HILIC,理論上親水性越強的化合物,在Hilic柱上被保留的時間越長。市面上有兩款Hilic柱在極性化合物的保留能力方面頗受廣大科研工作者的青睞,但在進行氨基糖苷類抗生素化合物分析檢測時,因基質殘留大、穩定性差、重現性不好、靈敏度不高等原因而未受認可。
 

Idea 2
 
另外一個思路是在流動相中添加七氟丁酸(HFBA)、三氟乙酸(TFA)等離子對試劑來增強極性化合物的保留,GBT21323-2007《動物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測定高效液相色譜-質譜/質譜法》中,使用100mM HFBA作為流動相,結合常規的C18柱,對這類化合物保留良好。
 
 
但是,TFA、HFBA等離子對試劑,負離子響應極強,進到質譜中極易殘留且不容易洗掉,極大地影響其他負離子化合物的檢測靈敏度,質譜分析中是不建議使用離子對試劑的。另外,國標方法中,進樣量大(30μL),基質效應明顯,其檢測的10種氨基糖類抗生素LOQ分別為50ppb、300ppb,靈敏度不高
 
檢測氨基糖苷,賽默飛有妙招!
賽默飛氨基糖苷類抗生素(AGs)檢測方法包
 
賽默飛采用Thermo Scientific™ Vanquish™ Binary Horizon液相系統與Thermo Scientific™ TSQ Fortis™三重四極桿質譜儀聯用平臺,通過在流動相中添加TFA和HFBA等離子對試劑,搭配Thermo Scientific™ Acclaim™ AmG C18 氨基糖苷類抗生素檢測的專用柱(可耐pH范圍0.5~10),來增強這些極性化合物的保留,再結合賽默飛離子色譜專利的電解再生膜抑制器技術,去掉TFA和HFBA離子,避免污染質譜
 
 
Vanquish™ Binary Horizon液相系統與TSQ Fortis™三重四極桿質譜儀聯用平臺
 
基于這樣的理念和賽默飛獨有的技術平臺,成功建立了快速檢測動物源食品中14種氨基糖苷類抗生素殘留的方法(潮霉素、阿米卡星、安普霉素、巴龍霉素、卡那霉素、鏈霉素、奈替米星、慶大霉素、大觀霉素、雙氫鏈霉素、妥布霉素、新霉素、西索米星、依替米星)。
 
 
Acclaim™ AmG C18 氨基糖苷類抗生素檢測的專用柱
 
樣品前處理方式與國標GBT21323-2007一致,21min內獲得良好的分離(國標35 min),敏度滿足國標要求,LOQ均≤20ppb(進樣量5μL)且連續6針的RSD均<14%,連續進50針豬肉基質樣品后,保留時間精密度和峰面積重復性良好,RTs偏差≤±0.03min,各化合物50ppb的峰面積重復性均<11%,本方案快速靈敏、可靠穩定
 
 
電解再生膜抑制器
 
部分實驗數據展示
 
14種氨基糖苷類抗生素在21min內實現良好保留和分離。
 
 
抑制器原理小貼士
 
在下圖抑制器原理圖中,兩邊是選擇性透過膜,中間為流動相通道,通過電解水作用,在陰極產生OH⁻置換出流動相中的TFA⁻和HFBA⁻,直接從陽極排到廢液。
 

 
參考文獻
 
徐媛,陳達,鐘新林,徐牛生,LC-MSMS結合離子色譜電解再生膜抑制器技術快速檢測動物源食品中14種氨基糖苷類抗生素殘留
 
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相關公司:賽默飛世爾科技(色譜與質譜)
聯系電話:13386161207
E-mail:ping.shen2@thermofisher.com


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