新品：逍鵬類器官研究新利器—類器官專用回收液

瀏覽次數(shù)：2446　發(fā)布日期：2023-2-17　來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明出處

背景

類器官的來源廣泛，樣本材料經(jīng)過不同方法處理后需要在體外進(jìn)行培養(yǎng)，構(gòu)建3D培養(yǎng)模型。不同細(xì)胞外基質(zhì)可采用的培養(yǎng)方法也會存在差異，但都可以為類器官體外培養(yǎng)提供生長的微環(huán)境。其中VitroGel水凝膠為無動物源成分的功能性水凝膠，室溫下與細(xì)胞培養(yǎng)基或含離子成分的溶液混合即可成膠，類器官培養(yǎng)方法多樣；而目前使用較多的Matrigel或其它含動物源成分的基質(zhì)膠，所有操作或材料需要在冰上進(jìn)行預(yù)冷，且主要以圓頂（Dome）形式進(jìn)行類器官培養(yǎng)。類器官培養(yǎng)成熟后使用VitroGel類器官回收液進(jìn)行處理，可獲得完整且活率較高的類器官培養(yǎng)物，可用于凍存或傳代培養(yǎng)以及下游研究。

VitroGel類器官專用回收液產(chǎn)品特點(diǎn)

✦Vol .1

• 兩分鐘從動物源ECM上回收完整的類器官/細(xì)胞

• 高回收率

• 支持從2D ECM包被平板上回收細(xì)胞

• 穩(wěn)定的無酶配方

• 易于使用，室溫下操作

• 保質(zhì)期長，無需冷藏包裝運(yùn)輸

VitroGel類器官專用回收液與其它品牌回收液的比較

項目	VitroGel	Company C	Company R	Company S
從動物源ECM回收的時間	2 min	約60 min	約60 min	至少30 min
回收率&細(xì)胞活率	高	中	中	中
便捷性	高	低	低	中
從2D ECM包被平板回收細(xì)胞	可以	/	/	/
無需冷鏈運(yùn)輸	是的	/	/	是的
存儲條件	2-30℃	2-8℃	2-8℃	15-35℃
保質(zhì)期	12個月	3個月	2個月	N/A

VitroGel類器官專用回收液操作流程

✦Vol .2

✦ 動物源ECM系統(tǒng)的類器官/細(xì)胞回收操作 ✦

✦ VitroGel系統(tǒng)的類器官/細(xì)胞回收操作 ✦

VitroGel類器官專用回收液應(yīng)用比較

✦Vol .3

01、VitroGel類器官回收液回收Matrigel系統(tǒng)上類器官兩種方法的效果比較

✦ A、Method 1：利用VitroGel類器官回收液重懸類器官培養(yǎng)物，移液吹打形成小塊進(jìn)行傳代培養(yǎng)/擴(kuò)增。

✦ B、Method 2：在不使用移液管的前提下，利用VitroGel類器官回收液混合類器官培養(yǎng)物，均勻搖晃離心管以收獲完整的類器官。

結(jié)果顯示，兩種方法均可以回收獲得較為完整的類器官，且傳代培養(yǎng)后正常增殖。

圖1 VitroGel類器官回收液回收Matrigel系統(tǒng)上類器官兩種方法的效果比較

✦ 02、VitroGel類器官和細(xì)胞回收液回收Matrigel系統(tǒng)上類器官的效果比較

在Matrigel上培養(yǎng)類器官3天，通過使用VitroGel類器官回收液和VitroGel細(xì)胞回收液進(jìn)行Matrigel類器官的回收。結(jié)果顯示，室溫下分別孵育2分鐘（VitroGel類器官回收液，MS04）和10分鐘（VitroGel細(xì)胞回收液，MS03），離心收集類器官后，MS04溶液中的Matrigel完全溶解，而MS03溶液中有少量的軟凝膠殘留。兩種回收液收獲的類器官繼續(xù)在Matrigel上傳代培養(yǎng)，下圖顯示了良好的類器官擴(kuò)增效果。

圖2 VitroGel類器官和細(xì)胞回收液回收Matrigel系統(tǒng)上類器官的效果比較

✦03、VitroGel類器官回收液與其它品牌類器官回收液的效果比較
利用MS04溶液與其它品牌的類器官回收液（SC公司的RLR溶液、SA公司的3OHS）開展對比研究。結(jié)果顯示，MS04溶液可輕松回收類器官，并破碎成小碎片狀進(jìn)行傳代培養(yǎng)；而RLR溶液和3OHS溶液回收的類器官很難破碎成小塊狀，且凝膠殘留較嚴(yán)重。MS04溶液顯示了更高的類器官回收率。

圖3 VitroGel類器官回收液與其它品牌類器官回收液的效果比較

項目	VitroGel類器官回收液	SC公司RLR溶液	SA公司3OHS溶液
孵育時間	2 min（室溫）	＞15 min（冰上）	＞15 min（冰上）
膠的溶解效果（離心）	全部溶解	大部分凝膠殘留	大部分凝膠殘留
搖晃重懸為小塊類器官	容易	困難	困難
回收效率	高	低	低

✦04、VitroGel類器官回收液回收Matrigel 2D包被培養(yǎng)的iPSC
使用MS04溶液回收Matrigel上培養(yǎng)的iPSC細(xì)胞，細(xì)胞脫落效果良好（圖A），培養(yǎng)孔板上基本沒有細(xì)胞殘留（圖B），再次接種后細(xì)胞生長狀態(tài)良好（圖C）。

圖4 VitroGel類器官回收液回收Matrigel 2D包被培養(yǎng)的iPSC

（A、細(xì)胞脫落的形態(tài)；B、細(xì)胞脫落后的平板；C、傳代后細(xì)胞形態(tài)）

小結(jié)
summary

目前，類器官培養(yǎng)技術(shù)正處于技術(shù)爆發(fā)和科研成果井噴的階段，行業(yè)發(fā)展具有很大的前景，但挑戰(zhàn)也是并存的。

例如，大多數(shù)類器官本身不具備血管化的結(jié)構(gòu)；如何在體外模擬腫瘤類器官與免疫細(xì)胞相互作用關(guān)系；類器官的重復(fù)性和一致性；以及類器官下游應(yīng)用的準(zhǔn)確性等。

總之，新的技術(shù)不斷涌現(xiàn)，必然助力再生醫(yī)學(xué)與精準(zhǔn)醫(yī)療領(lǐng)域的研究更上一層樓。

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品貨號	規(guī)格	產(chǎn)品描述
VitroGel®Organoid 水凝膠	VHM04-K	4*2 mL	即用型，類器官培養(yǎng)水凝膠，適用于多種類器官培養(yǎng)
VitroGel®Cell Recovery Solution	MS03	100 mL	無酶配方細(xì)胞/類器官回收液，從多種凝膠系統(tǒng)回收細(xì)胞/類器官
VitroGel®Organoid Recovery Solution	MS04	100 mL	無酶配方細(xì)胞/類器官回收液，從多種凝膠系統(tǒng)回收細(xì)胞/類器官