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OriCell第三屆細胞培養圖片大賽開始投票啦，感謝各位科研鏟屎官的熱情參與以及經驗分享！不論是漂亮組還是悲催組，小編都感受到了大家培養細胞的不易以及積極樂觀的心態，接下來就讓我們一起學習下部分小伙伴總結的成功或者失敗經驗吧：

來自投稿小伙伴們的經驗教訓

01

姓名：孫鑫

作品名稱：百變心肌boy

作品描述：該細胞為新生乳大鼠原代心肌細胞α-actin染色，心肌細胞在體外也無法增殖，每次分離的心肌細胞無法擴增與凍存，需要現取現用。原代心肌細胞可以伸展呈現多種細胞形態，在不同條件刺激下，心肌細胞表面積會發生變化，比正常心肌細胞更大，所以心肌細胞α-actin染色常用于心肌肥厚研究中。原代心肌細胞分離技術可作為研究心臟疾病實驗中的看家本領，是由于心肌細胞存活率較低，稍有不慎即可全軍覆沒，所以實驗操作時應小心謹慎動作輕柔。我們通過將原代心肌細胞接種在細胞爬片上，應用免疫熒光技術，在共聚焦顯微鏡下拍照，圖中心肌細胞肌節清晰可見，同時心肌細胞有不同的形態，甚是美觀。

02

姓名：潘威

作品名稱：人臍帶間充質干細胞

作品描述：此圖為第4代人臍帶間充質干細胞（hUC-MSCs），放大40倍，細胞呈長梭型。從臍帶提取原代MSC說起來就是一把辛酸淚（或許我該參加悲催組），用組織塊貼壁法第一次提等了足足半個月一個細胞沒見著，第二次通宵搞了二十皿，一周后終于看到個別組織塊周圍有細胞爬出來了，簡直要感動哭了。要說經驗的話感覺組織塊的處理是關鍵，盡量切成邊緣整齊的1mm³有厚度的小塊，鋪板之前加PBS洗一次，不然會皿底很“臟”，皿用培養基預先浸潤，鋪上組織塊后倒置30~60min再加適量培養基剛剛沒過組織塊就好，鋪板之后放在培養箱一個周一下都不要動，組織塊飄了肯定是收不到細胞的！提一次不容易，大家可以把活力強的組織塊挑出來復種，還可以爬出來細胞的，我最多的復種了四次，每次爬出來的都計為P0。

作品名稱：人臍帶間充質干細胞成骨誘導分化

作品描述：如圖所示為第4代人臍帶間充質干細胞成骨誘導分化（茜素紅染色），放大40倍和100倍，誘導35天。用的是OriCell人臍帶間質干細胞成骨誘導分化培養基試劑盒（HUXUC-90021），按說明書步驟做就好，先用明膠包被六孔板，融合度70%左右是加誘導分化培養基開始培養，培養時盡量不要動它，每三天換液，出現鈣結節的時候改為每兩天半量換液（20天左右）。培養過程中會看到細胞層“卷邊”像染菌一樣，淡定莫慌正常現象，換液時輕柔力度小一些就好，最初我也不知道“鈣結節”長什么模樣，多了之后顯微鏡下一團團黃色有點亮晶晶的東東就是了。當加上染液紅色暈染開來的時候，我知道我這一個多月沒有白等，值了。

03

姓名：郭佳

作品名稱：hiPSC

作品描述：圖為人源性多潛能干細胞（hiPSC），培養人多潛能干細胞誘導的心肌細胞大概需要40天，圖為剛復蘇培養了10天的干細胞，培養此類細胞耗費的時間較長，細胞需要抱團生存，消化的力度需要掌握好，消化后達到3，4個細胞抱團的效果最好，在孔板中，不能等到細胞占滿孔板再傳代，長的好時，大概每天換液，隔天傳代。

04

姓名：木子

作品名稱：神經球染色鑒定

作品描述：此圖為鼠源神經干細胞P1分離自E14.5的胎鼠皮層，培養3天后固定染色。圖為600×，紅色為sox2，綠色為nestin，均為神經干細胞的標志物。說明我們分離純化得到的細胞是神經干細胞或神經前體細胞。染出并利用confcol拍出好看的圖的秘訣是，自小鼠體內分離P1細胞后，培養天數不宜過久，2.5-3天為宜，此時神經球形態較好，呈圓型，且直徑不大，剛適合拍照。

05

姓名：實驗小白

作品名稱：細胞你怎么又雙叒叕染菌啦？

作品描述：即將用于劃痕實驗的HUVEC...用含10％血清+1％雙抗的DMEM培養基進行培養，好不容易等到它長滿了，結果準備劃痕的時候發現培養基出現渾濁，而且培養基表面有白色絲帶狀物質，顯微鏡下一看果然染菌了，而且密度還非常大，害太難受了！總結原因可能是直接接6孔板的時候沒有做的規范操作，同時沒有經常去看細胞狀態，等發現的時候已經來不及了！

還有更多精彩的作品，小編就不一一列舉出來了，感興趣的小伙伴可以點擊下方二維碼進行投票。請不要吝嗇你手中的票票，為給你分享經驗的小伙伴投上你寶貴的一票以示感謝吧~

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