CRISPR/CAS9基因編輯技術(shù)是近年生物技術(shù)領(lǐng)域的明星。關(guān)注該技術(shù)的人都知道，CRISPR/Cas9是一種在大多數(shù)細(xì)菌和古細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)的一種天然免疫系統(tǒng)，可用來對(duì)抗入侵的病毒及外源DNA。它從問世之初就一直備受矚目。2012年CRISPR/Cas9機(jī)理被揭示，2013年CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以對(duì)人體基因進(jìn)行編輯，2014年數(shù)百篇論文充斥科研界，2015年的 “定制胚胎”，2016年應(yīng)用到人體的試驗(yàn)，短短四年多時(shí)間，CRISPR/Cas9以其廉價(jià)、快速、簡(jiǎn)易的特點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)研究中引起一場(chǎng)變革。

 

從技術(shù)優(yōu)化、動(dòng)植物改良到疾病治療，以CRISPR基因編輯技術(shù)為支撐的研究和應(yīng)用越來越多。無論是科研人員還是醫(yī)藥企業(yè)都紛紛對(duì)該技術(shù)表現(xiàn)出極大的熱情和推崇，重慶威斯騰生物醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司醫(yī)學(xué)診斷事業(yè)部（以下簡(jiǎn)稱“威斯騰醫(yī)學(xué)診斷”）也是其中一員。創(chuàng)新一直以來都是威斯騰醫(yī)學(xué)診斷強(qiáng)調(diào)和執(zhí)行的理念。公司把創(chuàng)新貫穿到每個(gè)細(xì)節(jié)當(dāng)中，在新藥的開發(fā)上以及公司的運(yùn)營(yíng)上，都始終保持著最高漲的創(chuàng)新意識(shí)。

 

威斯騰醫(yī)學(xué)診斷CRISPR/CAS9團(tuán)隊(duì)組建與2013年，團(tuán)隊(duì)負(fù)責(zé)人申友鋒（高級(jí)工程師）曾在版納豬近交系重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室工作，致力于基因靶向操作技術(shù)研究，參與國(guó)家重大科研項(xiàng)目“973”項(xiàng)目，先后利用Talen技術(shù)成功敲除豬p53基因同時(shí)過表達(dá)H-ras+c-myc基因，成功構(gòu)建出豬的腫瘤模型。在實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目組建立了CRISPR/CAS9技術(shù)體系，成功敲除豬GGTA1基因、H19基因、leptin基因等。13年加入威斯騰生物，組建成立了CAS9研發(fā)團(tuán)隊(duì)，作為國(guó)內(nèi)首批運(yùn)用CRISPR/Cas9技術(shù)進(jìn)行基因藥物開發(fā)的企業(yè)，主要致力于CRISPR/Cas9技術(shù)基礎(chǔ)研究和病毒性疾病治療中的應(yīng)用。目前，該團(tuán)隊(duì)已經(jīng)在CRISPR/Cas9靶向基因修飾藥物開發(fā)平臺(tái)搭建、基因藥物開發(fā)等方面已經(jīng)取得了可喜的進(jìn)展。

 

據(jù)了解，威斯騰醫(yī)學(xué)診斷Cas9團(tuán)隊(duì)目前的工作重心主要包括：CRISPR/Cas9載體輔助轉(zhuǎn)基因體系的構(gòu)建和抗病毒基因藥物研發(fā)兩個(gè)方面。除了利用Talen、 CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建細(xì)胞、動(dòng)物模型，研究團(tuán)隊(duì)一直在致力于提高轉(zhuǎn)基因效率。通過改造CRISPR/Cas9系統(tǒng)，提高轉(zhuǎn)基因小鼠、細(xì)胞的效率。同時(shí)，研究團(tuán)隊(duì)還在致力于抗病毒基因藥物的研發(fā)，針對(duì)病毒基因組設(shè)計(jì)CRISPR/Cas9靶位點(diǎn)，破壞病毒基因組完整，清除病毒。目前公司針對(duì)乙肝病毒開展CRISPR/Cas9抗病毒基因藥物的研發(fā)。如果成功，將會(huì)革新傳統(tǒng)的乙肝治療手段和效率。

 

CRISPR/Cas9的運(yùn)用如火如荼之，但是圍繞其展開的專利之爭(zhēng)、安全顧慮和倫理?yè)?dān)憂，也讓時(shí)下研究人員不得不放緩腳步謹(jǐn)慎思考和應(yīng)用。更何況，CRISPR技術(shù)還處于不斷完善的不成熟狀態(tài)，所以對(duì)其應(yīng)用勢(shì)必存在局限和問題。回顧C(jī)as9團(tuán)隊(duì)對(duì)CRISPR技術(shù)產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用過程中出現(xiàn)的問題，無外乎安全和效率兩大問題：

 

1.CRISPR體系不成熟、脫靶效率高：

 

CRISPR存在重大的局限性就是會(huì)出現(xiàn)脫靶效應(yīng)（off-target effect）。CRISPR大神張鋒的研究小組通過創(chuàng)建了3個(gè)新版本的Cas9酶大大降低了CRISPR/Cas9系統(tǒng)的脫靶效應(yīng)，降低了該技術(shù)應(yīng)用的錯(cuò)誤率。

 

威斯騰醫(yī)學(xué)診斷Cas9團(tuán)隊(duì)的應(yīng)對(duì)策略是通過大量篩選基因靶位點(diǎn)，提高準(zhǔn)確率和切割效率。威斯騰醫(yī)學(xué)診斷申友鋒表示，一個(gè)技術(shù)，無論成熟與否，將其與實(shí)驗(yàn)室已有體系融合利用都需要反復(fù)摸索。回顧團(tuán)隊(duì)的研發(fā)之路，他笑言，加班加點(diǎn)、海量篩選方是增加成功概率的不變“捷徑”。

 

2.改造適合運(yùn)載CRISPR的病毒載體：

 

目前，對(duì)CRISPR病毒載體的優(yōu)化工作仍然是團(tuán)隊(duì)的工作重心之一。此外，除了篩選病毒載體之外，威斯騰醫(yī)學(xué)診斷還在考慮應(yīng)用納米載體。

 

CRISPR基因編輯技術(shù)是一把雙刃劍，它可以作為科學(xué)家探索未知、企業(yè)創(chuàng)新研發(fā)的工具之一，但是需要應(yīng)用之人懷著負(fù)責(zé)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲袘B(tài)度加以運(yùn)用。他強(qiáng)調(diào)，除了脫靶、切割效率等問題之外，還應(yīng)考慮到因?yàn)镃RISPR技術(shù)建立在人類基因組數(shù)據(jù)分析之上，而我們現(xiàn)在對(duì)人類基因組認(rèn)識(shí)還不完全，所以對(duì)其使用更應(yīng)該慎重再慎重。此外，基因編輯人體基因還涉及倫理、公平問題。

 

事實(shí)上，越來越多的公司看到了CRISPR將帶來的巨大商業(yè)價(jià)值。2015年年初，致力于CRISPR應(yīng)用于治療領(lǐng)域的Intellia Therapeutics獲諾華投資，共同加速發(fā)展CRISPR/Cas9技術(shù)在CAR-T細(xì)胞治療和造血干細(xì)胞中的應(yīng)用。同時(shí)，張峰創(chuàng)辦的Editas Medicine宣布將于2017年使用CRISPR進(jìn)行臨床試驗(yàn)來治療一種罕見失明癥狀。2016年7月6日四川大學(xué)華西醫(yī)院通過了長(zhǎng)達(dá)半年的倫理審批，并在10月份開展了全球首個(gè)將CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)應(yīng)用到人體的試驗(yàn)。10月，福泰制藥（Vertex）宣布于CRISPR Therapeutics藥物研發(fā)公司合作CRISPR藥物。緊接著，12月21日，拜耳與CRISPR Therapeutics宣布成立一家專注于開發(fā)和商業(yè)化血液疾病、失明和先天性心臟病新療法的合資企業(yè)。

 

與國(guó)外的大動(dòng)作不同，國(guó)內(nèi)基于CRISPR技術(shù)的商業(yè)運(yùn)作目前還處于比較平靜的態(tài)勢(shì)。威斯騰醫(yī)學(xué)診斷作為國(guó)內(nèi)進(jìn)軍CRISPR/Cas9技術(shù)藥物研發(fā)和疾病治療的第一梯隊(duì)成員，具備熟練運(yùn)用CRISPR技術(shù)在人、小鼠、豬等多物種的多個(gè)基因進(jìn)行基因敲除、基因敲入和基因修復(fù)等基因編輯工作，并在此基礎(chǔ)之上進(jìn)行CRISPR敲除基因靶點(diǎn)基因藥物的研發(fā)工作。未來， Cas9研發(fā)團(tuán)隊(duì)將繼續(xù)疾病治療的創(chuàng)新項(xiàng)目研究，盡早實(shí)現(xiàn)CRISPR技術(shù)藥物研發(fā)、疾病治療的預(yù)期價(jià)值。