賽默飛世爾公司產品KingFisher系列自動化磁珠提取純化儀器，聯合Invitrogen公司Ambion病毒RNA提取試劑盒，將傳統方法的禽流感檢測由21天縮短至4小時左右。此技術經過美國國家獸醫服務實驗室(NVSL)驗證，是美國農業部認可的禽流感檢測的分子生物學方法。該技術已由賽默飛世爾公司引進中國，將對促進我國禽產品的出口創匯、降低成本和疫情早期診斷具有重大意義。

禽流感快速高通量檢測新技術是基于分子生物學的方法，在病毒感染的初期即可快速確診病毒的存在。該方法包括兩大主要步驟。第一步，聯合使用賽默飛世爾公司的KingFisher自動化磁珠提取純化儀器，及Invitrogen公司的Ambion病毒RNA提取試劑盒，進行自動化的病毒RNA提取。該步驟需要約30分鐘。第二步，實時定量RT-PCR檢測病毒RNA。該步驟需要約3小時。整體方法經過優化，并經過超過200,000禽類咽喉拭子樣品的檢測驗證。

這項技術可以用于從生物體液和無細胞樣品中，如血清、血漿、口腔拭子和細胞培養液中，提取病毒RNA。從無細胞樣品中分離純化RNA比從組織和培養細胞中分離純化RNA更具挑戰性。這是因為低的病毒滴度、大的操作體積和樣品的復雜性，且操作步驟必須適合實時定量RT-PCR。使用自動化磁珠提取方法可滿足上述各項要求，賽默飛世爾公司的KingFisher專利磁珠提取技術，不需有機溶劑或RNA沉淀步驟，消除了基于濾膜的方法經常碰到的問題，如濾膜堵塞、大的洗脫體積和不穩定的產率。而結合后續的實時定量RT-PCR，可儀檢測到低至10拷貝的病毒RNA，極大提高了禽流感病毒檢測的靈敏度。

禽流感快速高通量檢測新技術比較傳統方法的優勢

• 靈敏度極高，可從100-400ul樣品中分離到少至10拷貝的病毒RNA
• 對于96個樣品，整個磁珠提取純化過程不超過30分鐘，整個禽流感檢測過程不超過4個小時
• 用于低病毒濃度時尤其理想
• 線性純化效率低至50轉錄子
• 經美國國家獸醫服務實驗室(NVSL)認證可用于AI/ND病毒

線性純化效率可低至10拷貝的轉錄子

用MagMAX病毒RNA提取試劑盒，可以從血漿和血清中定量純化病毒RNA，線性范圍大于約5個數量級。這可由血漿、血清和水樣品的試驗體系中，以系列稀釋的RNA作對照。

圖一 病毒RNA提取效率

圖一的定量RT-PCR結果說明RNA的純化率在很大的病毒濃度的范圍內均為線性，含少至10個拷貝的轉錄子的樣品也可被純化。

基于磁珠的純化技術的好處

磁珠用于從細胞中純化RNA和從無細胞樣品中純化病毒RNA有許多好處。RNA產率更穩定，不僅是實驗到實驗間的差異極小，而且是大范圍的樣品尺寸所得到的RNA產率也很穩定。磁珠技術消除了因細胞聚集而產生濾膜堵塞的情況，因為高效的磁珠結合僅需很小體積的磁珠，所以結合的RNA用20-50ul的不含核酸酶的水就可以洗脫。這使得磁珠純化技術對于從大體積、稀釋樣品中濃縮RNA極其有用。

圖二 賽默飛世爾公司KingFisher Flex自動化磁珠提取純化儀

KingFisher(圖二)專利的磁珠提取純化技術，用轉移磁珠代替了轉移溶液，因此具有更高的提取純化效率和產率。

關于賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)

賽默飛世爾科技 (Thermo Fisher Scientific)(紐約證交所代碼：TMO)是全球科學服務領域的領導者，致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。公司年銷售額超過100億美元，擁有員工約33,000人，在全球范圍內服務超過350,000家客戶。主要客戶類型包括：醫藥和生物公司，醫院和臨床診斷實驗室，大學、科研院所和政府機構，以及環境與工業過程控制裝備制造商等。公司借助于Thermo Scientific和Fisher Scientific這兩個主要的品牌，幫助客戶解決在分析化學領域從常規的測試到復雜的研發項目中所遇到的各種挑戰。Thermo Scientific能夠為客戶提供一整套包括高端分析儀器、實驗室裝備、軟件、服務、耗材和試劑在內的實驗室綜合解決方案。Fisher Scientific為衛生保健，科學研究，以及安全和教育領域的客戶提供一系列的實驗室裝備、化學藥品以及其他用品和服務。賽默飛世爾科技將努力為客戶提供最為便捷的采購方案，為科研的飛速發展不斷地改進工藝技術，提升客戶價值，幫助股東提高收益，為員工創造良好的發展空間。欲獲取更多信息，請瀏覽公司的網站：www.thermo.com.cn