本實驗室現提供腫瘤細胞培養技術服務, 腫瘤成功關鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面,腫瘤與正常組織并無原則差別,初代培養應用組織塊和消化培養法均可。
1.取材:
人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區,取材時盡量避免用退變組織,要挑選活力較好的部位。癌性轉移淋巴結或胸腹水是好的培養材料。取材后宜盡快進行培養,如因故不能立即培養,可貯存于4℃中,但不宜栽過24小時。
2.培養基:
腫瘤細胞對培養基的要求不如正常細胞嚴格,一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy5A等培養基等皆可用于腫瘤。腫瘤細胞對血清的需求比正常細胞低,正常不加血清不能生長,腫瘤細胞在低血清培養基中也能生長。腫瘤細胞對培養環境適應性較大,是因腫瘤細胞有自泌(Autocrine)性產生促生長物質之故。但這并不說明腫瘤細胞完全不需要這些成分。按不同細胞需要不同的生長因子;腫瘤細胞與正常細胞之間、腫瘤細胞與腫瘤細胞之間對生長因子的需求都存在著差異。但大多數腫瘤中仍需要生長因子。有的還需特異性生長因子〔如細胞等)。總之培養腫瘤細胞仍需加血清和相關生長因子培養更易成功。
3.成纖維細胞的排除:
成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長,致難以純化腫瘤細胞。而且成纖維細胞常比腫瘤細胞生長得快,最終能壓制腫瘤細胞的生長。因此排除成纖維細胞成為腫瘤中的關鍵。
聯系電話:13661449330,宋老師。QQ。另本實驗室還提供流式細胞檢測,流式分選,熒光定量PCR,半定量RT-PCR,Western Blot,ChIP染色質免疫共沉淀,免疫組化,高效液相蛋白芯片,transwell細胞小室,靶基因預測,細胞培養,PCR產物純化及形態學(石蠟切片,冰凍切片,免疫熒光,HE染色,拍照,細胞爬片等)。