1.3'-RACE的實(shí)驗(yàn)原理及流程
利用mRNA的3'末端的poly（A）尾巴作為一個(gè)引物結(jié)合位點(diǎn)，以連有SMART寡核營(yíng)酸序列通用接頭引物的Oligo（dT）30MN作為鎖定引物反轉(zhuǎn)錄合成標(biāo)準(zhǔn)第一鏈cDNA.然后用一個(gè)基因特異引物GSP1（genespecific primer，GSP）作為上游引物，用一個(gè)含有部分接頭序列的通用引物UPM（universalprimer，UPM）作為下游引物，以cDNA第一鏈為模板，進(jìn)行PCR循環(huán)，把目的基因3' 末端的DNA片段擴(kuò)增出來(lái)。
2..5'-RACE的實(shí)驗(yàn)原理及流程
先利用mRNA的3'末端的poly（A）尾巴作為一個(gè)引物結(jié)合位點(diǎn)，以O(shè)ligo（dT）30MN作為鎖定引物在反轉(zhuǎn)錄酶MMLV作用下，反轉(zhuǎn)錄合成標(biāo)準(zhǔn)第一鏈cDNA.利用該反轉(zhuǎn)錄酶具有的末端轉(zhuǎn)移酶活性，在反轉(zhuǎn)錄達(dá)到第一鏈的5'末端時(shí)自動(dòng)加上3-5個(gè)（dC）殘基，退火后（dC）殘基與含有SMART寡核苷酸序列Oliogo（dG）通用接頭引物配對(duì)后，轉(zhuǎn)換為以SMART序列為模板繼續(xù)延伸而連上通用接頭（見(jiàn)Figure2 ）。然后用一個(gè)含有部分接頭序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作為上游引物，用一個(gè)基因特異引物2（GSP 2genespecificprimer，GSP）作為下游引物，以SMART第一鏈cDNA為模板，進(jìn)行PCR循環(huán)，把目的基因5'末端的cDNA片段擴(kuò)增出來(lái)。最終，從2個(gè)有相互重疊序列的3'/ 5'-RACE產(chǎn)物中獲得全長(zhǎng)cDNA，或者通過(guò)分析RACE產(chǎn)物的3'和5'端序列，合成相應(yīng)引物擴(kuò)增出全長(zhǎng)cDNA。

海諾倫生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司(Shanghai Novland Co.,Ltd.)是從事生物醫(yī)藥及疾病檢測(cè)相關(guān)的高新技術(shù)企業(yè)。致力于疾病的核酸及生化檢測(cè)，以及生物醫(yī)學(xué)方向的各類產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的高科技生物技術(shù)公司。立足現(xiàn)有的技術(shù)優(yōu)勢(shì)和成本優(yōu)勢(shì)，經(jīng)過(guò)公司全體員工的一致努力，定向于前沿的疾病檢測(cè)技術(shù)的科研類產(chǎn)品，包括腫瘤相關(guān)的MicroRNAs、基因核酸檢測(cè)試劑盒開(kāi)發(fā)和相關(guān)檢測(cè)服務(wù)，流行性疾病的病毒檢測(cè)試劑盒開(kāi)發(fā)及相關(guān)檢測(cè)服務(wù)，在科研方向我們不斷追求更高品質(zhì)的技術(shù)，研制高品質(zhì)的產(chǎn)品，并將科技轉(zhuǎn)化為技術(shù)，技術(shù)轉(zhuǎn)化為產(chǎn)品，以科技為依托，建立為廣大科研工作者服務(wù)的科技產(chǎn)品和服務(wù)體系。公司是以研發(fā)為主導(dǎo)的高科技性質(zhì)企業(yè)，致力于生物學(xué)各類試劑以及疾病的檢測(cè)技術(shù)的不斷探索和創(chuàng)新，創(chuàng)建了服務(wù)于科研工作者的生化試劑以及臨床體外診斷試劑研發(fā)技術(shù)平臺(tái)，逐步推進(jìn)試劑的“系列化”、“一體化”發(fā)展目標(biāo)、內(nèi)外兼修、精細(xì)致遠(yuǎn)。