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microRNA實時熒光定量PCR服務
引物探針設計合成,Real-Time PCR 檢測,TaqMan 探針法,染料法。
服務類別:分子與細胞總訪問:619
最后更新:2013-7-22半年訪問:2
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  • 公司簡介

 microRNA熒光定量PCR 

實時熒光定量PCR技術是在PCR反應體系中加入熒光試劑或使用熒光探針法,利用熒光信號實時檢測PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR能夠專一、靈敏、快速、高重復性地精確定量起始模板濃度。但是就成熟的microRNA而言,由于其是由21-25個核苷酸組成的小RNA,長度太短,并不能通過傳統的實時定量PCR進行檢測,但是通過特殊設計的莖環結構的反轉錄引物,配合實時定量PCR引物及探針可以精確檢測微量樣品中microRNA表達水平,也可以用終點PCR法定性檢測。

檢測方法 
TaqMan 探針法,染料法。 

服務內容
以絕對定量檢測為例
1) 引物探針設計合成
客戶提供基因序列,上海諾倫公司設計并合成引物及探針。
2) Real-Time PCR 檢測
對客戶提供的樣本,進行抽提純化Real-Time PCR反應,并提供服務檢測報告。

服務流程 
樣品準備→ 總RNA提取→反轉錄 → 熒光定量PCR檢測 → 數據分析及結論。

技術優勢 
1.高特異性 , 可以只對成熟 microRNA 進行定量,有效區分成熟 microRNA 分子和前體分子以及其它成熟 microRNA 的同源分子;
2.快速,簡單,省時,整個操作只需兩步,不到 3 個小時,即可獲得高質量的數據;
3.檢測靈敏度高,樣品消耗少,僅需 1-10ng 的總 RNA 或 50pg 左右的 microRNA ;
4.超寬的線性范圍,可跨越 7 個數量級;

服務要求 
1)請認真填寫熒光PCR檢測技術服務委托單。
2)進行miRNA表達量分析時,請寄送足量且保證純度的總RNA(濃度在500ng/μl以上,體積在20μl以上)。
3)如果提供的材料為細胞或組織,DNA、RNA抽提費用另收,同時應保證材料新鮮,動物細胞數為106個以上,動物組織為20 mg以上。

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