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慢病毒、腺相關病毒包裝實驗技術服務
艾游生物提供慢病毒、腺相關病毒包裝實驗技術服務
服務類別:分子與細胞總訪問:1097
最后更新:2012-4-7半年訪問:1
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慢病毒包裝

產品介紹:
       慢病毒載體(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基礎上改造而成的病毒載體系統,它能高效的將目的基因(或RNAi)導入動物和人的原代細胞或細胞系。慢病毒載體基因組是正鏈 RNA,其基因組進入細胞后,在細胞漿中被其自身攜帶的反轉錄酶反轉為DNA,形成DNA整合前復合體,進入細胞核后,DNA整合到細胞基因組中。整合后 的DNA轉錄mRNA,回到細胞漿中,表達目的蛋白;或產生RNAi干擾。
      慢病毒載體介導的基因表達或RNAi干擾作用持續且穩定,原因是目的基因整合到宿主細胞基因組中,并隨細胞基因組的分裂而分裂。另外,慢病毒載體能有效感 染并整合到非分裂細胞中。以上特性使慢病毒載體與其它病毒載體相比,比如不整合的腺病毒載體、整合率低的腺相關病毒載體、只整合分裂細胞的傳統逆轉錄病毒 載體,有鮮明的特色。大量文獻研究表明,慢病毒載體介導的目的基因長期表達的組織或細胞包括腦、肝臟、肌肉、視網膜、造血干細胞、骨髓間充質干細胞、巨噬 細胞等。
     慢病毒載體不表達任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位無細胞免疫反應,體液免疫反應也較低,不影響病毒載體的第2次注射。

技術特點:
    1、將目的基因/RNAi基因轉入難以轉染的細胞,比如神經元細胞、干細胞或其它原代細胞;
    2、制備穩定表達/沉默特定基因的單克隆細胞株;
    3、將目的基因/RNAi基因轉入動物組織,以期獲得長期表達;
    4、轉基因動物,特別是轉基因大鼠的制備。

服務流程:

    

    A. 慢病毒載體的構建:

        根據不同的研究需求構建慢病毒載體,如用于RNAi的慢病毒載體、用于基因過表達的慢病毒載體、用于啟動子活性研究的慢病毒載體等;


    B. 慢病毒包裝過程:

         將重組病毒質粒及其輔助包裝質粒共轉染至包裝細胞中,收集富含慢病毒顆粒的細胞上清液,對其濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液,在293T細胞中測定并標定病毒滴度。

應用案例:

   

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