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慢病毒包裝服務
英茂盛業完整的慢病毒載體體系配合包裝體系,為客戶提供高效的慢病毒包裝服務。我們可以為您完成從獲取目標基因和有效干擾片段到提供高滴度慢病毒的全部過程。
服務類別:分子與細胞總訪問:1848
最后更新:2012-3-8半年訪問:9
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服務商: 北京英茂盛業生物科技有限公司 查看該公司所有服務 >>
  • 服務介紹
  • 公司簡介

服務特點

1、根據客戶實驗需要靈活定制慢病毒載體包裝服務,滿足客戶研究的多種需要。
2、慢病毒純化服務根據實驗要求不同,包括細胞實驗級純化和活體實驗級純化,您可以根據具體需要選擇不同的純化方式,幫助您節約實驗成本。
3、病毒滴度測定采用熒光細胞流式細胞技術或者感染細胞基因組DNA RT-PCR檢測,病毒滴度直接體現病毒感染效果。比采用檢測p24或者病毒顆粒計數更加準確可靠。
 

慢病毒包裝步驟

1、慢病毒載體質粒和包裝質粒質粒共轉染293T細胞;

2、培養48~72h,收集培養上清;

3、病毒純化和濃縮;

4、滴度測定、目的基因檢測;

5、出具檢測報告;

6、干冰運輸發貨。

 

慢病毒純化

根據客戶需求,對不同用途的慢病毒產品,我們分別采用細胞實驗級和活體實驗級兩種純化方式。細胞實驗級純化采用超速離心法對病毒顆粒進行純化濃縮。這種純化方法的優點在于純化價格比較低,產品質量能滿足細胞實驗需要。但由于純化方法相對比較劇烈,最終的純化產品中存在一些碎裂的病毒成分如病毒蛋白、以及少量殘留細胞培養產物和助沉淀劑。這些成分在用于活體實驗時可能會引起動物的免疫反應,但在細胞實驗中一般不會產生影響。

活體實驗級純化采用溫和的親和層析純化,極少發生病毒碎裂從而大幅減少病毒蛋白釋放。由于對病毒顆粒的選擇性親和,雜質蛋白和成分極少,一般不會引起實驗動物免疫反應,適合用于活體實驗。

 

滴度測定

1、帶有GFP或DsRED熒光標簽的慢病毒載體。采用病毒感染細胞后直接進行流式細胞計數,計算病毒滴度。

2、不帶熒光標簽的慢病毒載體。采用病毒感染細胞后,提取細胞DNA,進行實時定量PCR,計算進入細胞的病毒DNA拷貝數。

以上兩種檢測方法通過對病毒感染的活細胞數量計數,直接體現病毒的感染力,即有活性的病毒數量。常見的病毒滴度檢測方法如病毒顆粒計數和p24檢測,無活力病毒和病毒蛋白碎片也會進入計數范圍。滴度不能反映病毒的使用效果。

 

產品質量控制

質量指標包括:

* 載體質粒構建檢測

* 產品無菌檢測

* 滴度檢測

* 目的基因的PCR檢測

 

服務費用
病毒滴度,    體積,    純化級別,      服務費用
10^7TU/ml, 1ml,    細胞實驗級,   5600
10^8TU/ml, 1ml,    細胞實驗級,   7600元
10^9TU/ml, 1ml,    細胞實驗級,   11600元
10^8TU/ml, 1ml,    活體實驗級,   18000元
10^9TU/ml, 1ml,    活體實驗級,  24000元

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